محققان در تلاشند تا بینش های پیش بالینی را بهینه کنند و در عین حال استفاده از حیوانات را به حداقل برسانند و اغلب به سگ ها و NHP ها به دلیل اندازه و ارتباط فیزیولوژیکی آنها روی می آورند. با این حال، پیمایش در پیچیدگی های مطالعه و اختلافات فیزیولوژیکی، به ویژه در ماکاک ها و بیگل ها، چالش های منحصر به فردی را ارائه می دهد. در اینجا ملاحظات کلیدی وجود دارد:
1. داده های پیش از آزمایش:
جمعآوری منظم دادههای قبل از آزمایش به ردیابی تغییرات در طول زمان، تسهیل سازگاری با رویهها و شناسایی شرایط سلامت غیرعادی کمک میکند. پارامترهایی مانند تعداد گلبول های قرمز (RBC)، تعداد نوتروفیل ها و فعالیت آنزیم های کبدی به عنوان شاخص های حیاتی عمل می کنند. حذف حیوانات با پارامترهای غیر طبیعی، تفسیر داده ها را افزایش می دهد.
2. متغیرهای طراحی آزمایشی:
نمونه گیری خون برای مطالعات فارماکوکینتیک/فارماکودینامیک (PK/PD) رایج است اما ممکن است بر پارامترهایی مانند تعداد RBC و فعالیت آنزیم عضلانی تأثیر بگذارد. حفظ شرایط استاندارد در طول نمونه برداری ضروری است. متغیرهایی مانند سن حیوان، روزه داری و روش تجویز نیز بر تفسیر داده ها تأثیر می گذارند.
3. گلبول های قرمز خون:
سگ ها و ماکاک ها در مقایسه با جوندگان طول عمر RBC بیشتری دارند. تغییرات منطقهای در گلبولهای قرمز ماکاک خرچنگخوار بر تعداد تأثیر میگذارد، در حالی که عواملی مانند فعالیت طحال و میانگین غلظت هموگلوبین بدن (MCHC) بر تفسیر دادهها و معیارهای خروج تأثیر میگذارند.
4. گلبول های سفید خون:
نوتروفیل ها و لنفوسیت ها بر تعداد گلبول های سفید خون محیطی در گونه ها غالب هستند، اما نسبت ها به طور قابل توجهی متفاوت است. سگها معمولاً تعداد نوتروفیلهای بالاتری (50-75% WBCs) در مقایسه با ماکاکها (25-50%) نشان میدهند که هنوز از جوندگان بیشتر است. پاسخهای التهابی قویتر به واسطه نوتروفیلها در سگها و ماکاکها، به دلیل تعداد محدود حیوانات و عوامل مخدوشکننده مانند لکوسیتوز ناشی از استرس، چالشهایی را در تفسیر تغییرات مربوط به مواد آزمایشی ایجاد میکند. لنفوسیتوز گذرا در ماکاک های سالم ممکن است در بیشتر موارد نشان دهنده عفونت های ویروسی باشد.
5. انعقاد:
سگ ها کوتاه ترین زمان پروترومبین (PT) را دارند که نیاز به حساسیت بالایی در آنالایزرهای انعقادی دارند. برخی از بیگلها فاقد فاکتور انعقادی VII هستند، PT کمی گسترشیافته، که در دادههای قبل از آزمایش قابل تشخیص است. محدوده زمان ترومبوپلاستین جزئی فعال شده ماکاکی (APTT) میتواند با دستههای معرفهای مختلف دو برابر شود و تفسیر را پیچیدهتر کند. انحراف از رویه های استاندارد توجه را ایجاب می کند.
http://www.prisysbiotech.com/nhp-pharmacology/coagulation-hemostasis-nonhuman-primates.html
6. عملکرد کبد:
آلانین آمینوترانسفراز (ALT) برای تشخیص آسیب سلول های کبدی نقش اساسی دارد. سگها محدوده ALT ({0}} IU/L) باریکی از خود نشان میدهند که امکان تشخیص حساس تغییرات ناشی از مواد آزمایش را فراهم میکند. محدوده ALT Macaque گسترده تر است، تحت تاثیر سن و اغلب عفونت تحت بالینی هپاتیت A. افزایش گذرا ALT پس از عفونت ممکن است تفسیر را پیچیده کند. آلکالین فسفاتاز (ALP) در سگ ها حساس است اما ماکاک ها برای مشکلات صفرا حساس نیست. گاما گلوتامیل ترانسفراز (-GT) در ماکاک ها حساس تر و اختصاصی تر است. بیلی روبین تام در هر دو گونه غیر قابل اعتماد است.
7-عملکرد کلیه:
سطح اوره و کراتینین در بیگلهای جوان باریک است و آنها را به شاخصهای حساس اثرات کلیوی در مطالعات بالینی تبدیل میکند. با این حال، تنوع در ماکاک ها گسترده تر است. تجزیه و تحلیل ادرار به دلیل چالشهایی که در جمعآوری نمونه از حیوانات غیرهمکار وجود دارد، بینشهای محدودی ارائه میدهد. تکنیک های بهبود یافته مانند کاتتریزاسیون ممکن است کیفیت نمونه را افزایش دهد.
8-آسیب عضلانی:
ارزیابی آسیب عضلانی در سگ ها راحت تر از ماکاک ها است. صدمات اتفاقی ناشی از رویه ها در ماکاک ها رایج است که در تغییرات در فعالیت کراتین کیناز (CK) منعکس می شود. تروپونین های قلبی نشانگرهای بهتری برای آسیب میوکارد در هر دو گونه هستند و از ایزوآنزیم ها پیشی می گیرند.
9. کربوهیدرات ها، پروتئین ها و لیپیدها:
گلوکز خون در ماکاک ها به طور معمول کمتر است، اما می تواند به دلیل استرس در طول جمع آوری افزایش یابد. سطوح بالا ممکن است نشان دهنده دیابت باشد و نیاز به ارزیابی مجدد دارد. ماکاک ها دارای غلظت پروتئین کل و گلوبولین بالاتری هستند که به طور گسترده ای در نوسان است. افزایش گلوبولین ممکن است نشان دهنده التهاب یا عفونت باشد.
10. مواد معدنی و الکترولیت ها:
تفاوت کلسیم و فسفات در ماکاک ها از سگ ها بیشتر است. غلظت الکترولیت در ماکاک ها می تواند به طور قابل توجهی متفاوت باشد و گهگاه سطوح بالایی نیز مشاهده می شود. به طور کلی، این پارامترها بینش های ارزشمندی را در مورد عملکرد اندام ها و اثرات بالقوه مواد آزمایش در مطالعات پیش بالینی ارائه می دهند.
نتیجه گیری:
تفسیر دادههای آسیبشناسی بالینی در مطالعات مربوط به سگها و ماکاکها تحت تأثیر عوامل مختلفی از جمله اندازه نمونه کوچک، تنوع فردی حیوانات و سایر عوامل مرتبط با مطالعه است. در حالی که تفاوتهای جمعیت همچنان مهم هستند، تغییرات فردی حیوانات ممکن است اهمیت شاخص بیشتری داشته باشند. تفسیر مناسب دادههای آسیبشناسی بالینی مستلزم ارزیابی کامل همه دادههای موجود، درک ویژگیهای گونهها و در نظر گرفتن تأثیر متغیرهای مختلف طراحی مطالعه است.
